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    Tn5文庫構建的載體選用和產品亮點
    發布時間:2020-07-28 點擊量:377
       Tn5文庫構建將某種生物細胞的整個基因組DNA切割成大小合適的片段,并將所有的這些片段都與適當的載體連接,引入相應的宿主細胞中保存和擴增。
      Tn5文庫構建的載體選用:載體能夠容載的DNA的片段大小直接影響到構建完整的基因文庫所需要的重組子的數目。載體要求容量大,所要求的DNA的片段數目越少,所需的重組子越少。
      cDNA克隆的基本過程是通過一系列酶催化反應,使poly(A)mRNA轉變成雙鏈cDNA群體并插入到適當的載體分子上,轉化寄主細胞,構建包含所有基因編碼序列的cDNA基因文庫。
      在研究過程中,多采用酵母單雜或雙雜進行文庫構建。這項技術在植物的自交不親和機理研究,病毒蛋白篩選,轉錄因子等信號通路蛋白篩選,癌癥醫學與寄生蟲醫學的凋亡相關蛋白和半乳糖凝集素互作蛋白篩選等多個領域有廣泛的應用作用。
     
      Tn5文庫構建的產品亮點:
      1、整個建庫流程包括:RNA逆轉錄、RNA/cDNA雜合鏈的片段化、鏈置換和PCR擴增,整個反應在同一管中完成,總體耗時僅需2h,手動操作時間少于15min。
     
      2、該試劑盒共有三種規格,分別適用于投入RNA量為100ng、10ng和1ng的建庫反應,可根據實驗類型進行選擇。
     
      3、兼容不同應用,可根據需要選擇進行普通轉錄組或總RNA經rRNA去除后的RNA文庫構建。
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